ISO 22980:2020

Tobacco — Determination of the content of total alkaloids as nicotine — Continuous-flow analysis method using KSCN/DCIC

This document specifies a method for the determination of the content of total alkaloids as nicotine in tobacco by continuous-flow analysis. This method is applicable to leaf samples, stems, reconstituted tobacco sheet materials and tobacco blends.

Tabac — Détermination de la teneur en alcaloïdes totaux exprimés en nicotine — Méthode par analyse en flux continu à l’aide de KSCN/DCIC

Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en alcaloïdes totaux exprimés en nicotine dans le tabac, par analyse en flux continu. Cette méthode est applicable aux échantillons de feuilles, aux tiges, aux matériaux en feuilles de tabac reconstituées et aux mélanges de tabac.

General Information

• Status: Published
• Publication Date: 23-Jun-2020
• ICS: 65.160 - Tobacco, tobacco products and related equipment
• Technical Committee: ISO/TC 126/SC 2 - Leaf tobacco
• Drafting Committee: ISO/TC 126/SC 2 - Leaf tobacco
• Current Stage: 6060 - International Standard published
• Start Date: 24-Jun-2020
• Due Date: 08-Dec-2019
• Completion Date: 24-Jun-2020

Relations

• Consolidated By: ISO 13078-3:2023 - Dentistry — Dental furnace — Part 3: Test method for the evaluation of high temperature sintering furnace measurement with a separate thermocouple
• Effective Date: 06-Jun-2022

Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 22980
First edition
2020-06
Tobacco — Determination of the
content of total alkaloids as nicotine
— Continuous-flow analysis method
using KSCN/DCIC
Tabac — Détermination de la teneur en alcaloïdes totaux exprimés en
nicotine — Méthode par analyse en flux continu à l’aide de KSCN/DCIC
Reference number
ISO 22980:2020(E)
©
ISO 2020

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ISO 22980:2020(E)

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2020
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
below or ISO’s member body in the country of the requester.
ISO copyright office
CP 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Geneva
Phone: [phone]
Fax: [phone]
Email: [e-mail]
Website: www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2020 – All rights reserved

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ISO 22980:2020(E)

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Preparation of solutions . 2
6.1 General . 2
6.2 System wash solution . 3
6.3 5 % acetic acid solution . 3
6.4 Sampler wash solution . 3
6.5 Potassium thiocyanate solution . 3
6.6 Sodium dichloroisocyanurate (DCIC) solution . 3
6.7 Neutralisation solution A . 3
6.8 Neutralisation solution B . 3
6.9 Buffer solution A . 3
6.10 Buffer solution B . 3
7 Preparation of standards . 3
7.1 General . 3
7.2 Nicotine stock solution . 4
7.3 Working standards . 4
8 Apparatus . 4
9 Procedure. 4
9.1 Preparation of samples for analysis . 4
9.2 Test portion . 4
9.3 Preparation of test extract . 4
10 Calculation . 5
11 Repeatability and reproducibility . 5
12 Test report . 6
Annex A (informative) Suitable flow diagrams . 7
Bibliography . 8
© ISO 2020 – All rights reserved iii

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ISO 22980:2020(E)

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/ iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 126, Tobacco and tobacco products,
Subcommittee SC 2, Leaf tobacco.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
iv © ISO 2020 – All rights reserved

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ISO 22980:2020(E)

Introduction
In 2014, the CORESTA Routine Analytical Chemistry Sub-Group (RAC) undertook a collaborative
study of two methods for the determination of total alkaloids in tobacco (as nicotine) by segmented
continuous-flow analysis. The two methods are ISO 15152 and a new method proposed by the China
National Tobacco Quality Supervision and Test Center. In ISO 15152, cyanogen chloride is generated
in situ by the reaction of potassium cyanide and chloramine T. The proposed method eliminates
the use of the potassium cyanide (KCN) by employing potassium thiocyanate (KSCN) with sodium
dichloroisocyanurate dihydrate (DCIC) for colour development. Each method was tested using water
extracted tobacco and 5 % acetic acid extracted tobacco. Calibration standards were prepared with the
same extraction solutions.
© ISO 2020 – All rights reserved v

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INTERNATIONAL STANDARD ISO 22980:2020(E)
Tobacco — Determination of the content of total alkaloids
as nicotine — Continuous-flow analysis method using
KSCN/DCIC
1 Scope
This document specifies a method for the determination of the content of total alkaloids as nicotine in
tobacco by continuous-flow analysis. This method is applicable to leaf samples, stems, reconstituted
tobacco sheet materials and tobacco blends.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
ISO 13276, Tobacco and tobacco products — Determination of nicotine purity — Gravimetric method using
tungstosilicic acid
3 Terms and definitions
No terms or definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at http:// www .electropedia .org/
4 Principle
An aqueous extract (see the next paragraph) of the tobacco is prepared and the total alkaloids
content (as nicotine) of the extract is measured by reaction of sulfanilic acid and cyanogen chloride.
Cyanogen chloride is produced in situ by reaction of potassium thiocyanate (KSCN) and sodium
dichloroisocyanurate (DCIC). The developed brown colour is measured at 460 nm.
A collaborative study has shown that the method give
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 22980
Première édition
2020-06
Tabac — Détermination de la teneur
en alcaloïdes totaux exprimés en
nicotine — Méthode par analyse en
flux continu à l’aide de KSCN/DCIC
Tobacco — Determination of the content of total alkaloids as nicotine
— Continuous-flow analysis method using KSCN/DCIC
Numéro de référence
ISO 22980:2020(F)
©
ISO 2020

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ISO 22980:2020(F)

DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
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Tous droits réservés. Sauf prescription différente ou nécessité dans le contexte de sa mise en œuvre, aucune partie de cette
publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: [phone]
E-mail: [e-mail]
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Publié en Suisse
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ISO 22980:2020(F)

Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 1
5 Réactifs . 1
6 Préparation des solutions . 2
6.1 Généralités . 2
6.2 Solution de rinçage du système . 3
6.3 Acide acétique à 5 % . 3
6.4 Solution de rinçage de l’échantillonneur . 3
6.5 Solution de thiocyanate de potassium . 3
6.6 Solution de dichloroisocyanurate de sodium (DCIC) . 3
6.7 Solution de neutralisation A . 3
6.8 Solution de neutralisation B . 3
6.9 Solution tampon A . 3
6.10 Solution tampon B. 4
7 Préparation des étalons . 4
7.1 Généralités . 4
7.2 Solution mère de nicotine. 4
7.3 Étalons de travail . 4
8 Appareillage . 4
9 Mode opératoire. 5
9.1 Préparation des échantillons à analyser . 5
9.2 Prise d'essai . 5
9.3 Préparation de l’extrait pour essai . 5
10 Calculs . 5
11 Répétabilité et reproductibilité . 6
12 Rapport d’essai . 7
Annexe A (informative) Schémas opérationnels adaptés . 8
Bibliographie . 9
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ISO 22980:2020(F)

Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux.
L'ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l'élaboration du document sont indiqués dans l'Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l'ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l'intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l'ISO liés à l'évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l'adhésion
de l'ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www .iso .org/ iso/ avant -propos .html.
Le présent document a été élaboré par le Comité technique ISO/TC 126, Tabac et produits du tabac,
sous-comité SC 2, Tabac en feuilles.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ members .html.
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ISO 22980:2020(F)

Introduction
En 2014, le sous-groupe de chimie analytique en routine (RAC) du CORESTA a réalisé une étude
collaborative portant sur deux méthodes de détermination des alcaloïdes totaux dans le tabac
(exprimés en nicotine) par analyse en flux continu segmenté. Les deux méthodes sont celle présentée
dans l’ISO 15152 et une nouvelle méthode proposée par le Centre national chinois d’essai et de
supervision de la qualité du Tabac. Dans l’ISO 15152, le chlorure de cyanogène est produit in situ par
la réaction du cyanure de potassium avec la chloramine T. La méthode proposée élimine l’utilisation
de cyanure de potassium (KCN) grâce à l’utilisation de thiocyanate de potassium (KSCN) avec du
dichloroisocyanurate de sodium dihydraté (DCIC) pour le développement de la coloration. Chaque
méthode a été soumise à essai avec du tabac extrait à l’eau et du tabac extrait à l’acide acétique à 5 %.
Les solutions d’étalonnage ont été préparées avec les mêmes solutions d’extraction.
© ISO 2020 – Tous droits réservés v

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NORME INTERNATIONALE ISO 22980:2020(F)
Tabac — Détermination de la teneur en alcaloïdes totaux
exprimés en nicotine — Méthode par analyse en flux
continu à l’aide de KSCN/DCIC
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en alcaloïdes totaux
exprimés en nicotine dans le tabac, par analyse en flux continu. Cette méthode est applicable aux
échantillons de feuilles, aux tiges, aux matériaux en feuilles de tabac reconstituées et aux mélanges
de tabac.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
ISO 13276, Tabac et produits du tabac — Détermination de la pureté de la nicotine — Méthode
gravimétrique à l'acide tungstosilicique
3 Termes et définitions
Aucun terme n'est défini dans le présent document.
L'ISO et l'IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l'adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l'adresse http:// www .electropedia .org/
4 Principe
Un extrait aqueux (voir alinéa suivant) de tabac est préparé et la teneur en alcaloïdes totaux (exprimés
en nicotine) contenue dans l’extrait est mesurée par réaction avec de l’acide sulfanilique et du chlorure
de cyanogène. Le chlorure de cyanogène est produit in situ par la réaction du thiocyanate de potassium
(KSCN) et du dichloroisocyanurate de sodium (DCIC). La couleur brune produite est mesurée à 460 nm.
Un essai interlaboratoires a montré que cette méthode donne des résultats équivalents pour l’extraction
à l’eau et à l’acide acétique à 5 %. Des extraits à l’acide acétique à 5 % doivent être utilisés dans le cas
d’analyses simultanées des alcaloïdes totaux (exprimés en nicotine) et des substances réductrices (voir
l’ISO 15153) ou des hydrates de carbone réducteurs (voir l’ISO 15154).
5 Réactifs
Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique reconnue. Tous les réactifs doivent être utilisés
selon les bonnes pratiques de laboratoire.
© ISO 2020 – Tous droits réservés 1

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ISO 22980:2020(F)

1)
5.1 Éthe
...

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 22980
First edition
Tobacco — Determination of the
content of total alkaloids as nicotine
— Continuous-flow analysis method
using KSCN/DCIC
Tabac — Détermination de la teneur en alcaloïdes totaux exprimés en
nicotine — Méthode par analyse en flux continu à l’aide de KSCN/DCIC
PROOF/ÉPREUVE
Reference number
ISO 22980:2020(E)
©
ISO 2020

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ISO 22980:2020(E)

COPYRIGHT PROTECTED DOCUMENT
© ISO 2020
All rights reserved. Unless otherwise specified, or required in the context of its implementation, no part of this publication may
be reproduced or utilized otherwise in any form or by any means, electronic or mechanical, including photocopying, or posting
on the internet or an intranet, without prior written permission. Permission can be requested from either ISO at the address
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Published in Switzerland
ii PROOF/ÉPREUVE © ISO 2020 – All rights reserved

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ISO 22980:2020(E)

Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Preparation of solutions . 2
6.1 General . 2
6.2 System wash solution . 3
6.3 5 % acetic acid solution . 3
6.4 Sampler wash solution . 3
6.5 Potassium thiocyanate solution . 3
6.6 Sodium dichloroisocyanurate (DCIC) solution . 3
6.7 Neutralisation solution A . 3
6.8 Neutralisation solution B . 3
6.9 Buffer solution A . 3
6.10 Buffer solution B . 3
7 Preparation of standards . 3
7.1 General . 3
7.2 Nicotine stock solution . 4
7.3 Working standards . 4
8 Apparatus . 4
9 Procedure. 4
9.1 Preparation of samples for analysis . 4
9.2 Test portion . 4
9.3 Preparation of test extract . 4
10 Calculation . 5
11 Repeatability and reproducibility . 5
12 Test report . 6
Annex A (informative) Suitable flow diagrams . 7
Bibliography . 8
© ISO 2020 – All rights reserved PROOF/ÉPREUVE iii

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ISO 22980:2020(E)

Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation on the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see the following
URL: www .iso .org/ iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 126, Tobacco and tobacco products,
Subcommittee SC 2, Leaf tobacco.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
iv PROOF/ÉPREUVE © ISO 2020 – All rights reserved

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ISO 22980:2020(E)

Introduction
In 2014, the CORESTA Routine Analytical Chemistry Sub-Group (RAC) undertook a collaborative
study of two methods for the determination of total alkaloids in tobacco (as nicotine) by segmented
continuous-flow analysis. The two methods are ISO 15152 and a new method proposed by the China
National Tobacco Quality Supervision and Test Center. In ISO 15152, cyanogen chloride is generated
in situ by the reaction of potassium cyanide and chloramine T. The proposed method eliminates
the use of the potassium cyanide (KCN) by employing potassium thiocyanate (KSCN) with sodium
dichloroisocyanurate dihydrate (DCIC) for colour development. Each method was tested using water
extracted tobacco and 5 % acetic acid extracted tobacco. Calibration standards were prepared with the
same extraction solutions.
© ISO 2020 – All rights reserved PROOF/ÉPREUVE v

---------------------- Page: 5 ----------------------
INTERNATIONAL STANDARD ISO 22980:2020(E)
Tobacco — Determination of the content of total alkaloids
as nicotine — Continuous-flow analysis method using
KSCN/DCIC
1 Scope
This document specifies a method for the determination of the content of total alkaloids as nicotine in
tobacco by continuous-flow analysis. This method is applicable to leaf samples, stems, reconstituted
tobacco sheet materials and tobacco blends.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
ISO 13276, Tobacco and tobacco products — Determination of nicotine purity — Gravimetric method using
tungstosilicic acid
3 Terms and definitions
No terms or definitions are listed in this document.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at http:// www .electropedia .org/
4 Principle
An aqueous extract (see the next paragraph) of the tobacco is prepared and the total alkaloids
content (as nicotine) of the extract is measured by reaction of sulfanilic acid and cyanogen chloride.
Cyanogen chloride is produced in situ by reaction of potassium thiocyanate (KSCN) and sodium
dichloroisocyanurate (DCIC). The developed brown colour is measured at 460 nm.
Collaborative studies have shown that the method gives equivalent results for w
...